7893年05月04日 来源东南大学附属中大医院重症医学科 阅读:326次
第二弹重磅来袭!
江苏省重症医学重点实验室科研仪器共享平台二期开放啦!
1.平台简介
江苏省重症医学重点实验室是东南大学附属中大医院依托东南大学建立,由江苏省科学技术厅批复成立的省级学科重点实验室。实验室科研仪器共享平台纳入东南大学大型仪器管理系统统一管理,在满足本实验室科研需求的同时面向生命科学、医学、药学等学科提供技术支持服务。
根据仪器的功能和应用方向,平台分为多功能成像平台、流式平台、样本制备平台、纳米分析平台、病理平台、生化和分子生物学平台。目前平台已配备超高分辨率激光扫描共聚焦显微镜、活细胞工作站、分选型流式细胞仪、超多通道流式细胞仪、小动物PET/CT、近红外二区小动物成像仪、光片显微镜等先进仪器设备。
为积极推进学校大型仪器设备资源共享制度实施,满足日益增长的科研工作需要,以及落实省级重点实验室服务社会的功能,遵循"开放、共享”的原则,江苏省重症医学重点实验室科研仪器共享平台将对全院、全校乃至校外各单位提供共享、技术支持服务。
2.预约方式
使用江苏省重症医学重点实验室科研仪器共享平台设备的老师和同学,请收藏以下两个网站:
东南大学大型仪器管理系统
https://dxyq.seu.edu.cn
江苏省重症医学重点实验室仪器管理平台
http://jspklccm.seu.edu.cn/genee
(1)东南大学的老师在预约使用设备前需要在“江苏省重症医学重点实验室仪器管理平台”进行注册登记,并同时在“东南大学大型仪器管理系统”和“江苏省重症医学重点实验室仪器管理平台”上进行预约登记。其中东南大学大型仪器管理系统的注册使用,请参照东南大学仪器平台相关规定进行。
(2)校外用户在预约设备前,可以自行在“江苏省重症医学重点实验室仪器管理平台”注册账号,并查看具体设备信息,具体预约以及付费方式联系杨然老师,电话号码(微信同号)13813376191。
平台所有设备已在东南大学大型仪器管理系统进行开放共享,每台设备可预约具体时间段及收费标准请登录大学系统查看(预约人需提前联系设备管理老师确认样本制备等相关要求)。
3.二期开放可预约仪器
多功能影像平台
小动物PET/CT
1.品牌与型号:PET/CT Si78(BRUKER)
2.主要性能指标:
(1)PET:高达0.7mm的空间分辨率,高达12%的灵敏度,150x80mm FOV,真正的DOI,全FOV的分辨率一致,超快速 GPU重建(MLEM,OSEM和MAP);
(2)CT :52µm分辨率,80(200)x80mm FOV单个/多个床位,心脏门控成像,2-5倍剂量减少。
3.服务领域:神经科学研究、肿瘤研究、心脏病学研究、临床前药物研究以及遗传基因研究等。
4.样本要求:直径不超过8cm的小动物。
5.设备管理员:杨然(13813376191)
近红外二区小动物成像仪
1.品牌与型号:Photon/IR VIVOTM
2.主要性能指标:活体成像,一区荧光成像:LED光源,激发波长范围:390-490nm(blue),530-570nm(green),620-650nm(red->No excitation filter),630-680nm(far-red),740-790nm(NIR);发射波长范围需要覆盖500nm–550nm,575nm–640nm,690nm–740nm,810nm- 860nm等常用荧光范围;二区荧光成像(900-1600nm);808和890nm激光,功率可调。
3.服务领域:设备可广泛应用于血流动力学,药物在脑部血流,下肢血流,淋巴管中代谢情况,药动学分析,肿瘤转移、缺血、神经、炎症、淋巴以及心血管、药动学动物模型研究和靶向生物材料、荧光探针的分析与评价。具备高分辨率高灵敏度的小动物荧光、生物发光成像以及实时成像功能,可实现超高的图像分辨率和灵敏度采集,以及超低的像素分辨率,同时其实时成像功能必须可实现荧光和生物发光信号的快速采集,从而动态分析信号变化,靶向指示药物、蛋白、细胞、外泌体、纳米材料、药物载体及荧光探针在体内的生物分布,并对信号进行动力学(MTT、BFI等)分析,并显示下肢血流、脑部血流和下肢淋巴管等分布图像。
4.样品要求:小鼠荧光实验建议使用激发波长大于630nm 的荧光探针;DAPI,FITC波段探针,小鼠有毛发等自发荧光干扰,不建议活体拍摄,可做离体拍摄。
5.设备管理员:陈慧(17856318711)
光片显微镜
1.品牌与型号:3i Lattice LightSheet
2.主要性能指标:
光片照明:系统采用晶格状贝塞尔光片(Lattice Bessel Light Sheet)照明由空间光调制器(Spatial Light Modulator)产生并控制,光片最薄为400nm。①成像模式:正置成像,激光无需穿过盖玻片,可以更好对样品上表面无挤压的自然状态进行成像。②超分辨成像:拥有基于光片照明的结构光照明显微成像模式(Structure Illumination Microscopy Mode)。
成像分辨率:SIM超分辨成像模式三轴分辨率可达150nm×230nm×280nm。
成像物镜:25倍水浸物镜,NA=1.1,工作距离WD=2.0mm。
相机:Flash4.0相机,提供82%的量子效率。
激光器:四线激光器,波长和强度分别为:405nm 350mW, 488nm 300mW,560nm 2000mW,642nm 2000mW。
样品仓:全自动样品仓,由生物惰性材料制成,水密,抗高温高压,具有高精度温度控制系统,温度控制范围,室温以上3℃到60℃,具有二氧化碳,氧气和湿度调控功能。
3.服务领域:晶格光片显微镜是以超高分辨率长时间观察活细胞及胚胎发育动态过程的强有力工具。系统使用晶格结构光片替代了传统的高斯光片,形成在同样视野下薄10倍的光片(在视野下均匀400nm照明),在降低了光剂量的同时还利用晶格结构光实现了SIM超分辨成像。利用晶格光片显微镜可以观察亚细胞结构(线粒体、囊泡等)、细胞间相互作用、胚胎发育等多种微观结构和生物进程,通过亚细胞分辨率的长时间动态超分辨三维成像观察,可以实现在亚细胞水平探索疾病发病和胚胎发育的机制等。
4.样本要求:细胞需贴壁培养在直径5mm的圆形玻璃片上,荧光标记可选通道405nm、488nm、561nm和640nm。
5.设备管理员:陈慧(17856318711)
流式平台
超多通道流式细胞仪
1.品牌与型号:Cytek Aurora
2.主要性能指标:配置5根固态激光器,具备FSC、SSC及18个荧光检测器,可同时检测20个参数。主要参数如下: 488nm(FITC:530/30,PerCP:710/50);640nm(APC:670/30,APC-Cy7:780/60,Alexa fluor700:710/50);355nm(BUV395:379/28,BUV737:740/35);561nm(PE:586/15,PE-Texas Red:610/20,PE-Cy5:670/30,PE-Cy5.5:710/50,PE-Cy7:780/60);405nm(BV421:450/50,BV510:525/50,BV605:610/20,BV650:670/30,BV710:710/50,BV785:780/60)。
3.服务领域:流式细胞分选仪可根据发射光的荧光强度和波长将发光颗粒分开并可实现单克隆选择,能对复杂样本中的细胞进行鉴定、分类、定量和分离,单次可同时对其中一种到四种特定细胞进行超高速分选纯化、高通量单克隆分选或细胞芯片制备。分选后的细胞能直接用于培养、移植、核酸提取、单细胞PCR扩增或原位杂交等,可进一步进行细胞基因、蛋白、功能水平的研究和不同细胞之间的差异化的研究。
4.样品要求:单细胞悬液,上机前用300目滤膜过滤,样品体积200-500ul,细胞密度0.5-5×106cells/mL。
5.设备管理员:周雪纯(18351992095)
多通道流式细胞仪
1.品牌与型号:CYTEK/NORTHERN LIGHTS
2.主要性能指标:配置3个固体激光器:405nm、488nm、640nm。所有激光器空间立体激发,不共线。1个前向角检测通道,带488nm带通滤光片的高性能半导体检测器;2个侧向角检测通道,带405nm和488nm带通滤光片的两个高性能半导体检测器。不少于30个完全独立荧光检测通道,且能实现至少24种染料同时标记的实验。其中:405nm激光器检测模块:420nm-829nm非均带宽配置的16个通道:488nm激光器检测模块:498nm-829nm非均匀带宽配置的14个通道。荧光检测灵敏度:FITCS35MEFL、PES10MEFL、APCS10MEFL。细胞获取速度≥35000细胞/秒。
3.服务领域:自发荧光检测技术:支持检测细胞自发荧光光谱并将其作为独立的参数进行解析,去除细胞自发荧光的影响。采用光谱拆分技术,可以通过荧光染料光谱数据,实现多重标记荧光染料自动拆分,操作简便,无需调节补偿。
4.样品要求:单细胞悬液,上机前用300目滤膜过滤,样品体积200-500ul,细胞密度0.5-5×106cells/mL。
5.设备管理员:杨然(13813376191)
生化平台
数字PCR系统
1.品牌与型号: 法国STilla公司 Naica
2.主要性能指标:
①可同时对FITC/ FAM / VIC(HEX)/CY5四种荧光同时检测;自动进行假阳性质控、荧光串扰补偿质控、数据溯源质控;兼容染料法和探针法;
② 可直接使用第三方PCR反应预混液(MIX)。
3.服务领域:
① 超微量核酸的绝对定量检测;
② 应用在肿瘤机制研究、肿瘤用药或术后监测研究、疾病早期分子诊断研究、遗传病检测、微生物感染和病毒载量分子检测、新冠病毒检测、流感病毒检测、无创产前诊断研究、转基因成分检测、核酸类标准品绝对定量等研究。
③ 检测类型包含DNA/RNA的绝对定量、稀有单碱基变异检测、融合基因检测、拷贝数变异检测、基因表达检测、全细胞基因组扩增、微滴内PCR产物回收、NGS数据验证、NGS靶向序列富集建库等多种类型。
4.样品要求:DNA、RNA。
5.设备管理员:陈慧(17856318711)
双模式多光谱激光成像系统
1.品牌与型号:美国Azure Sapphire FL
2.主要性能指标:Sapphire FL从分子检测到活体成像是专为应用灵活性研发的终极激光扫描成像系统。基于定制化、用户可自主更换的激光器和滤光片模块,Sapphire FL可轻松满足客户多样化、深入的科研需求。Sapphire FL具有定制化的、用户可自主更换的光学模块,5-1000μm的扫描分辨率,-1.0至+6mm的Z轴扫描功能,用于活体成像的5个麻醉输出端口以及化学发光检测模块等。
3.服务领域:Sapphire FL激光扫描成像系统广泛适用于多种分子生物学实验的结果分析,如荧光Western、In-Cell Western、In-Gel Western、蛋白芯片、核酸芯片、二维电泳、DNA凝胶、考马斯亮蓝染色凝胶、荧光组织切片,活体成像等等。仪器支持近红外荧光,可见光,磷屏成像(放射性同位素自显影成像)。
4.样品要求:近红外、可见荧光染料标记的凝胶、印迹膜、组织切片、芯片、微孔板和动植物活体等样品。
5.设备管理员:杨然(13813376191)
384孔qPCR仪
1.品牌与型号:瑞士Roch/Lightecycler 480II(384通量)
2.主要性能指标:384通量,荧光通道数6通道,仅需40分钟即可完成40个循环qPCR实验。配置CCD相机,所有样本同时检测,快速精准。升温速度4.4℃/秒,降温速度2.2℃/秒。温控精确度±0.1℃,Cq均一性达到±0.15,轻松区分1000与2000拷贝浓度差异,支持高分辨率熔解曲线(HRM)分析,精确度0.01℃。
3.服务领域:
①实时荧光定量,PCR产物进行标记跟踪,计算待测样品模板的初始浓度等等。
②核酸的相对定量检测。
③检测类型包含DNA/RNA的相对定量、稀有单碱基变异检测、融合基因检测、拷贝数变异检测、基因表达检测。
④肿瘤标志物及瘤基因检测实现肿瘤病诊断;遗传基因检测实现遗传病诊断。动物疾病检测、食源微生物、食品过敏源、转基因、乳品企业阪崎肠杆菌等检测。医学、农牧、生物相关分子生物学定量研究。
4.样品要求:DNA、RNA。
5.设备管理员:周雪纯(18351992095)
多功能微孔板检测仪
1.品牌与型号:美国 Angilent/Synergy NEO2
2.主要性能指标:
①吸收光检测波长范围:至少230-999nm, 1nm步进;
②荧光检测波长范围:250-750nm,光栅带宽可变:3-50nm,1nm步进;
③ 化学发光检测波长范围:300-700nm,动态范围:>6个数量级,并且具有动态扩展功能;
④ 荧光共振能量转移功能,激发波长:485/20;发射波长:528/20,575/15;
⑤ 荧光偏振功能,激发波长:485/20;发射波长:EM 530/25;
⑥ 均相时间分辨荧光功能(HTRF),激发波长:330/80;发射波长:EM 620/10,665/8。
3.服务领域:
① 蛋白质组学研究,蛋白与蛋白相互作用,酶动力学检测(乙酰胆碱酯酶、乳酸脱氢酶等),酶活性相关分析(激酶、蛋白酶等)结构研究;
② 药物研究和筛选,GPCR、激酶、核受体、cAMP和cGMP、钙流,药物耐受途径研究,药物毒性评估等研究;
③ 功能基因组学研究,核酸、蛋白质的光吸收定量和荧光定量,基因表达调控研究(如荧光素酶、GFP、GUS等报告基因系统,核酸蛋白相互作用),信号转导通路研究(如受体配基结合、蛋白质-蛋白质相互作用,离子通道研究等),基因分型及突变检测等;
④ 细胞学研究,细胞浓度及细菌生长密度测定,细胞增殖、细胞毒性、细胞吞噬,细胞吸附、细胞渗透、细胞迁移,细胞凋亡、细胞转染研究等。
4.样品要求:孔板。
5.设备管理员:周雪纯(18351992095)
样本制备平台
全自动密度梯度制备/分离分析系统
1.品牌与型号:BioComp
2.主要性能指标:可检测类型:紫外:260nm/280nm,荧光:EGFP,mCherry,AlexaFluor488,AlexaFluor 555,AlexaFluor 568,Cy2,Cy3,Cy5等。
适用广泛,可用于十种以上的介质的梯度制备,包括sucrose,glycerol,Optiprep®,Nycodenz®,Ficoll®,Percoll®,Metrizamide,Renografin®,NaCl,CsCl,NaAc及KCl等介质。快速高效,同时完成6个或8个离心管样品的线性梯度制备。
3.服务领域:多聚核糖体分离,外泌体分离,亚细胞器分离,病毒分离纯化,纳米材料分离。
4.设备管理员:周雪纯(18351992095)
全自动磁性细胞分选仪
1.品牌与型号:德国Miltenyi autoMACS
2.主要性能指标:MACS(Magnetic Activated Cell Sorting)是一种集合了免疫学、细胞生物学、磁力学等知识于一体的高度特异性细胞分选技术。MACS技术是用超顺磁性微珠磁性标记细胞或生物分子,在一个高强度、梯度的磁场中,通过MACS分选柱分离出磁性标记的细胞。
3.服务领域:该仪器能顺序处理6个标本,自动进行细胞标记、细胞分选过程,包括自动进行细胞与磁珠的孵育、预冲分选柱、样本摄取、洗脱阳性成分和阴性成分、冲洗、清洗和分选柱的维护。分选纯度高达95%以上,回收率高达90%,细胞活性达95%以上。每个样本分选只需要2.5-10分钟,分选速度可达107细胞/秒。应用广泛:从不同的样本(包括全血、PBMC和组织解离成的单细胞悬液等)中分离各种不同类型的细胞,例如T细胞、B细胞、NK细胞、DC细胞、单核细胞等免疫细胞,以及干细胞,肿瘤细胞,神经细胞,酵母等。
4.样品要求:全血、PBMC和组织解离成的单细胞悬液等。
5.设备管理员:陈慧(17856318711)
超速离心机
1.品牌与型号:美国Beckman Optima XPN-100
2.主要性能指标:
①显示屏:15寸触摸式液晶显示屏
②最高转速:41000rpm(水平离心)/90000rpm(固定角度离心)
③最大相对离心力:288000g(水平离心)/694000g(固定角度离心)
④驱动系统:真空密封变频电机驱动系统
⑤加/减速率:10加速,11减速
⑥转速设定范围:1000-90000rpm
⑦转速控制精度:±2rpm
⑧温度设定范围:-0~40℃,增幅1℃
⑨温度控制精度:±0.3℃
⑩运行时间控制:999小时59分;Hold连续离心
3.服务领域:
①广泛用于生物样品(蛋白、核酸、脂质、细菌、病毒等)的沉淀、分离、收集、分析。
②外泌体提取:超速离心法分离提取外泌体已经是公认的“金标准”。
4.样品要求:
①超离管需自备;
②实验室配备4种转头:Type 100 Ti、Type 70 Ti、Type 45 Ti、SW 32 Ti。
5.设备管理员:周雪纯(18351992095)
核转染设备
1.品牌与型号:Lonza Nucleofector™ 4D
2.主要性能指标:
①外观尺寸(W×H×D):45×10.5×28cm(核心单元与X单元平行拼接放置)
②电源:230V,50-60Hz
③显示屏:5.7英寸可折放触摸屏操作,可通过USB接口与电脑连接进行软件的升级和数据的传送,软件可免费从网站下载更新
④摆放方式:核心模块(Core Unit)和X模块(X Unit)可平行拼接或者垂直叠放;Y模块(Y Unit)可进行通量的平行拓展(24孔)
3.服务领域:
利用传统的电穿孔技术配合高效率细胞转染液,通过预置的优化好的转染程序,直接把外源基因导入目标细胞的细胞核和细胞质中。与传统的电穿孔仪相比,对于原代细胞、干细胞以及难转染的细胞系等较难转染的哺乳动物细胞。
4.样品要求:
①转染试剂盒需自备,内含电转液、电转杯/电极条等,电转杯和电极条是一次性耗材;
②细胞系不要超过20-30代;
③Trypsin 提前放置于室温(用于贴壁消化),PBS、新鲜培养基和培养皿提前放置在37度;
④对细胞进行计数,按照指定细胞数进行离心,只离心一次,不要进行二次离心,在推荐的离心时间内,温室离心转速不超过100G或800RPM;
⑤避免悬浮细胞在电转液内储存时间超过15min;
⑥转染质粒体积不超过转染体系的10%,质粒高纯度,A260:A280大于1.8,建议使用无内毒素试剂盒提取质粒;
⑦将电转液(已混合细胞和质粒)加入电转杯/电极条时不要有气泡。
5.设备管理员:陈慧(17856318711)
肺器官芯片自动培养系统
1.品牌与型号:江苏艾玮得/INO0401
2.主要性能指标:
①配合器官芯片进行精准的微流控,控制液路流动速度培养、灌流和抽空速度可控范围为1μL/min~100μL/min;
②可放置在100%湿度,37度条件下的培养箱内长期(连续)使用可容纳至少15块芯片同时使用。
3.服务领域:用于对器官芯片(如肺、肠、皮肤、血脑屏障等)的长期或短期的灌注培养,模拟体内血流剪切力,为细胞/类器官提供稳定的营养物质,实现动态培养,实现氧气、营养物质的充分交换,构建人体高仿真,复杂的生理模型、感染免疫模型、病理模型等微环境模型。
4.样品要求:细胞系,正常组织类器官,肿瘤类器官等。
5.设备管理员:陈慧(17856318711)
4.首批开放可预约仪器
分选型流式细胞仪
分析型流式细胞仪
超高分辨激光扫描共聚焦显微镜
活细胞工作站
多功能明场、荧光和fish扫描仪
全自动免疫组化与原位杂交染色平台
纳米颗粒跟踪分析仪
纳米流式检测仪